匿名
2021/2/19 10:59:51
以提取RNA為例。 由于細胞內大部分RNA是以核蛋白復合體的形式存在,所以在提取RNA的時候要利用高濃度的蛋白質變性劑,迅速破壞細胞結構,使核蛋白與RNA分離,釋放出RNA。再通過酚,氯仿等有機溶劑處理,離心,使RNA與其他細胞組分分離,得到純化的總RNA。 在提取的過程中要抑制內源和外源的RNase活性,保護RNA分子不被降解,因此用到沒有RNA酶活性的異硫氰酸胍。 提取緩沖液中一般含有SDS,酚,氯仿,胍鹽等蛋白質變性劑,也能抑制RNase活性。并有助于除去非核酸成分。